Shinjon Cistanche Deserticola polisaxaridlari antioksidant ta'sirga ega
Aug 30, 2023
mavhum
Cistanche deserticola polisaxaridining antioksidant faolligi in vitroda o'rganildi. Askorbin kislotani nazorat qilish, gidroksil radikallarini hosil qilish uchun Fentonga o'xshash reaktsiyani olish, superoksid anion radikallarini ishlab chiqarish uchun dofaminning avtooksidlanish reaktsiyasi, natriy gipoxloritning vodorod peroksid bilan reaktsiyasi natijasida yagona kislorod, difenil achchiq gidrazin radikallari eksperimental model sifatida. , Cistanche deserticola polisaxaridlarining superoksid anion radikallariga ta'siri, gidroksil radikallari DPPH · erkin radikal (difenil achchiq gidrazin radikali), singlet kislorodning tozalash ta'siri. Natijalar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticolaning polisaxaridlari yuqoridagi erkin radikallarga aniq tozalash ta'siriga ega va tozalash effekti polisaxaridlar kontsentratsiyasi bilan ijobiy bog'liqdir.
Kalit so'zlar :Sistancu tubulosa Polisaccharid; Erkin radikal
1.Kirish
Organizm aerob metabolizmining oksidlanish-qaytarilish reaktsiyasining oraliq mahsuloti bo'lgan hayot faoliyatining oksidlanish almashinuvi jarayonida doimiy ravishda turli xil reaktiv kislorodli erkin radikallarni (ROS) ishlab chiqaradi.Tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, ortiqcha erkin radikallar hayotning makromolekulalari va turli organellalariga hujum qilib, molekulyar darajada, hujayra darajasida, to'qima va organlar darajasida turli xil zararlarga olib keladi, tananing qarish jarayonini tezlashtiradi va tromboz, diabet, ateroskleroz, o'smalar va boshqalar. [1]. Kimyoviy sintez qilingan antioksidantlarning inson organizmiga toksikligi tufayli kislorodli erkin radikallarni olib tashlaydigan yuqori samarali va past toksiklikka ega tabiiy antioksidantlarni izlash tibbiyot, oziq-ovqat, kimyo muhandisligi va boshqa sohalarda qizg'in tadqiqot mavzusiga aylandi. so'nggi yillar.
Sitstanche deserticola(YCMa.)Xitoyning noyob an'anaviy tibbiyoti va "cho'l jenshen" [2]. Cistanche deserticola mapolisakkarid Cistanche deserticolaning asosiy bioaktiv komponentlaridan biridir, ammo Cistanche deserticola polisaxaridining erkin radikallarni tozalash ta'siri bormi yoki yo'qligi haqida hech qanday hisobot yo'q. Ushbu maqolada Cistanche deserticola polisaxaridining superoksid anion radikali, gidroksil radikali, DPPH · erkin radikali va singlet kislorodga tozalash ta'siri uning antioksidant faolligini baholash va to'liq ishlab chiqish va foydalanish uchun ilmiy asos yaratish uchun spektral tahlil orqali aniqlandi. bu tabiiy resurs.
Xitoy o'ti cistanche
2. Eksperimental qism
2.1 Asboblar va reaktivlar
UV-2401 ultrabinafsha nurda koʻrinadigan spektrofotometr (Shimadzu, Yaponiya); LumatLB9507 o'ta sezgir quvurli luminometr (Germaniya
BertholdTechnologies); RE-52CS aylanma bug'latgich (Shanxay Yarong biokimyoviy asboblar fabrikasi); HW-SY elektron termostatik suv hammomi (Jintan Xinhang Instrument Factory); PHS-3C pH o'lchagich (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.); DZF-6020 vakuumli quritish pechi (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.). Cistanche deserticola: Kuitun farmatsevtika korporatsiyasidan sotib olingan. Luminol (Sigma, AQSH), dofamin (Xitoy farmatsevtika va biologik mahsulotlarni nazorat qilish instituti), FeSO4, EDTA, vitamin C, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3 va boshqalar mahalliy analitik reagentlardir. Tajribaviy suv ion almashinadigan distillangan suvdir.
2.2 Eksperimental usul
2.2.1 Ekstraksiya usuliSitstanche deserticolapolisakkarid
30 g Cistanche deserticola kukunini oling va uni 500 ml konussimon kolbaga soling. Uni neft efiriga (60-90 daraja), efirga va 80% etanol issiq eritmasiga (30 daraja) mos ravishda 6 soatga botiring va qoldiq erituvchini quritish uchun uchuvchi holga keltiriladi. Filtr qoldig'ini 24 soat davomida 1 ∶ 10 nisbatda suvda namlang, 30 daraja qizdiring va 100 daqiqa davomida chiqarib oling. Ekstraktsiyadan so'ng, supernatantni olish uchun santrifüj qiling. Supernatant pasaytirilgan bosim ostida konsentrlangandan so'ng, u 3 marta hajmdagi 95% etanol bilan cho'ktiriladi. 4 daraja haroratda 24 soat turishga ruxsat beriladi. Santrifüjdan so'ng u yig'iladi va cho'ktiriladi. Vakuumda quritgandan so'ng, Cistanche deserticolaning xom polisaxaridini olish mumkin. 1,00 g xom polisaxaridni torting, uni suv bilan eritib oling va kutish uchun 50 ml hajmli o'lchov kolbasiga soling.
Cistanche kukunli mahsulotlarini ko'rish uchun shu yerni bosing
【Batafsil ma'lumot so'rang】 Email:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
2.2.2 ning tozalash qobiliyatini tekshirishCistanche deserticolapolisaxarid O-2 · erkin radikalga aylanadi
Cistanche deserticola polisaxaridining O{{0}} · ni tozalash qobiliyati dopaminning avtooksidlanishidan superoksid erkin radikallarini (O-2 ·) ishlab chiqarish orqali tekshirildi [3]. 3.0ml {{10}},1mmol/LpH=10,12 karbonat bufer eritmasi, 3.0mL suv va {{18} qoʻshing. }}.5 ml turli konsentratsiyali polisaxarid namunasi eritmasi navbat bilan shkala bilan quritish probirkasiga. 30 darajali suv hammomida 5 daqiqa davomida oldindan qizdirilgach, 30 darajali suv hammomida oldindan qizdirilgan 1.0ml 2,0 mmol/l dopamin qo‘shing, darhol aralashtiring va vaqtni 30 daraja haroratda saqlang. 5 daqiqa davomida va 2 tomchi 10mol/l HCl bilan reaksiyani darhol to'xtating. Malumot sifatida bufer eritmasidan foydalaning, absorbansni (A namunasi) 221 nm da o'lchang, namunani (bo'sh A) bo'sh guruhdagi 0,5 ml suv bilan almashtiring va nazorat guruhidagi namunani 0,5 ml askorbin kislotasi bilan almashtiring. , har bir namunani uch marta parallel ravishda o'lchang va o'rtacha qiymatni oling. O-2 · tozalash darajasi (%)=(Bo'sh - namuna)/Bo'sh × 100%
2.2.3 ning tozalash qobiliyatini tekshirishCistanche deserticolapolisaxarid · OH erkin radikaliga
Desert tirik cistanche o'ti -Antioksidant
EDTA-Fe (Ⅱ) - metilen ko'k - H2O2 tizimi Cistanche deserticola polisaxaridining gidroksil radikalida tozalash qobiliyatini tekshirish uchun ishlatilgan. Printsip shundan iboratki, EDTA-Fe (Ⅱ) vodorod periks bilan reaksiyaga kirishib, OH erkin radikallarini hosil qiladi, bu esa 660 nm da metilen koʻk eritmasining xarakterli yutilish choʻqqisini pasaytiradi.
1.{1}}mL 5mmol/L LFeSO4 eritmasidan, 1,2ml 5mmol/L LEDTA eritmasidan, 2.0ml 0.03mol/L NaH2PO{ {12}}Na2HPO4 (pH=7.4) bufer eritmasi va 1,3 ml 2{23}}mmol/l vodorod peroksid eritmasidan tiqinlari bo‘lgan 1{26}}ml probirkalar seriyasiga, yaxshilab silkitib, 0,7 ml 0,2 mmol/L metilen ko‘k eritmasi qo‘shing, so‘ngra tekshiriladigan eritmadan 1,0 ml va turli konsentratsiyadagi C1,0 vitamini qo‘shing, 10 ga suyultiring.00 ml suv bilan yaxshilab aralashtiramiz, 37 daraja haroratda 30 daqiqa ushlab turing va 660 nm da har bir eritmaning absorbans qiymatini o'lchang, bo'sh guruh namuna eritmasini suv bilan almashtirdi. Har bir namuna uch marta parallel ravishda o'lchanadi va o'rtacha qiymat olinadi. · Namunaning OH radikalini tozalash darajasi (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × 100% formulada: A0 -- absorbans shikastlanmagan trubaning qiymati; A1 - shikastlangan naychaning absorbsiya qiymati; A2 -- Namuna qo‘shgandan keyin fotometrik qiymat.
2.2.4 DPPH · tozalash qobiliyati bo'yicha testSitstanche deserticolapolisakkarid
{0}},1 ml Cistanche deserticola polisakkarid eritmasidan oling va uni 5,0 mlLDPPH · eritmasiga qo'shing, tez aralashtiring va xona haroratida 10 daqiqa turing,
517nm to'lqin uzunligida uning absorbsiya o'zgarishini aniqlang [4]. Har bir namuna uch marta parallel ravishda o'lchanadi va o'rtacha qiymat olinadi. DPPH ning namunani tozalash darajasi · (%)=1 - [(AB)/A0] × 100% formulasida: A0 -- absorbans qiymati DPPH · (1,9mlLDPPH ·+0,1mL50% etanol) namunasiz; A - DPPH bilan reaktsiyadan keyin namunaning absorbsiya qiymati ·; B -- bo'sh namunaning absorbans qiymati (namuna 0,1ml+1,9mL 50% etanol).
2.2.5Cistanche deserticolapolisakkaridni tozalash uchun yagona kislorod 1O2 sinovi
Bir qatorli kislorod (1O2) NaClO va H2O2 ning 37 darajada kimyoviy reaksiyasi natijasida hosil bo'ladi [5]. 1O2 ni aniqlash uchun ishlatiladigan eritma 100 mk L2,8 mmol/L NaClO eritmasi, 400 mk L5 mmol/LNaOH eritmasi, 300 m L10 mmol/LH2O2 eritmasi, 50 m L1 mmol/Luminol eritmasi. Reaksiya vaqtida reaksiya eritmasi namuna eritmasiga qo'shiladi va xemiluminesans asbobi avtomatik ravishda reaksiya jarayonini bir vaqtning o'zida qayd etadi. Bo'sh boshqaruv sifatida NaClO-H2O2-NaOH-Luminolni oling. Reaksiyani boshlang va protsedurada belgilangan miqdorga muvofiq xemiluminesans asbobining saqlash shishasidan namuna trubasiga reaksiya eritmasini qo'shing. Keyin reaksiya aralashmasining xemiluminesans intensivligi har 5 soniyada qayd qog'ozga yozib boriladi, har bir namuna uch marta parallel ravishda o'lchanadi va o'rtacha qiymat olinadi.
Tozalash darajasi quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi: tozalash darajasi (%)=(yorug'lik intensivligini boshqarish - namunadagi yorug'lik intensivligini boshqarish)/yorug'lik intensivligini nazorat qilish × 100%
3 Natijalar va muhokama
3.1 ning tozalash ta'siriCistanche deserticolaO-2 ustidagi polisakkarid ·
Cistanche tubulosa-ning foydalari - Antiooksidlovchi
O-2 · kimyoviy xossasi faol bo‘lib, biofilmdagi yog‘ kislotalari peroksid hosil qiladi va keyin hujayralarni yo‘q qiladi [6]. Ushbu maqolada dopamin usuli O -2 · ning tozalash qobiliyatini aniqlash uchun ishlatilgan. Cistanche deserticola ning O-2 · ni tozalash qobiliyati 1-rasmda ko'rsatilgan. Natijalar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola polisaxaridi dofaminning autoksidlanishi natijasida hosil bo'lgan O-2 · ni inhibe qilishi mumkin va uning miqdori ortishi bilan ortadi. konsentratsiyasi o'lchangan kontsentratsiya oralig'ida (0-8mg/ml), lekin tozalash qobiliyati askorbin kislotadan past edi.
3.2 ning tozalash ta'siriSitstanche deserticolapolisakkarid · OH
·OH faol kislorod turlarining eng faol kislorodli erkin radikallaridan biridir. U tirik hujayralardagi deyarli har qanday biologik makromolekulalar bilan reaksiyaga kirisha oladi va organizm to‘qimalarida lipid peroksidlanishi, oqsil polimerizatsiyasi va depolimerizatsiyasi, nuklein kislotalarning parchalanishi va boshqalar kabi biokimyoviy jarayonlarga olib kelishi mumkin, bu esa to‘qima va hujayra kasalliklarini keltirib chiqaradi. turli kasalliklar va organizmning qarishini tezlashtiradi [7]. Cistanche deserticola polisaxaridining · OH ni tozalash qobiliyati 2-rasmda ko'rsatilgan. Natijalar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola polisaxaridi · OH ni yaxshi tozalash ta'siriga ega va kontsentratsiyaning oshishi bilan u ortib boradi.
3.3 Cistanche deserticola polisaxaridining DPPH ni tozalash qobiliyati ·
DPPH · (difenil achchiq gidrazin radikali) barqaror erkin radikal bo'lib, organik erituvchida binafsha rangga ega va 517 nm yaqinida kuchli so'rilishga ega. Antioksidantlar qo'shilgandan so'ng, ba'zi erkin radikallar chiqariladi, bu esa so'rilishni susaytiradi, bu moddaning antioksidant faolligini baholash uchun ishlatilishi mumkin [8]. Cistanche deserticola polisaxaridining DPPH · tozalash qobiliyati uchun 3-rasmga qarang. Eksperimental natijalar shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola polisaxaridining DPPH · dagi tozalash qobiliyati uning kontsentratsiyasi bilan ijobiy bog'liqdir va tozalash qobiliyati askorbin kislotadan kattaroqdir.
3.4 Cistanche deserticola polisaxaridini 1O2 gacha tozalash qobiliyati
Bir qatorli kislorod faol kimyoviy xususiyatlarga ega qo'zg'atilgan molekulyar kisloroddir. Bog'lanmagan elektronlar juftlashishga moyil bo'lganligi sababli, erkin radikallar faolroq kimyoviy xossalarni ko'rsatadi [9]. Cistanche deserticola polisaxaridining 1O2 gacha bo'lgan tozalash qobiliyati 4-rasmda ko'rsatilgan. Tajriba natijalari shuni ko'rsatdiki, Cistanche deserticola polisaxaridining tozalash qobiliyati 0-4.0mg oralig'ida askorbin kislotadan past bo'lgan. /ml, va Cistanche deserticola polisaxaridining kontsentratsiyasi 4.0mg/ml dan yuqori bo'lganida, uni tozalash qobiliyati askorbin kislotadan yuqori edi.
4. Xulosa
Cistanche deserticola polisaxaridlarining antioksidant faolligi in vitro turli reaktiv kislorodsiz radikal tizimlar orqali batafsil o'rganildi.Eksperimental natijalardan ko'rinib turibdiki, eksperimental kontsentratsiya oralig'ida Cistanche deserticolaning polisakkarid ekstrakti O -2 ·, · OH, DPPH · va 1O2 ga tozalovchi ta'sir ko'rsatadi va turli xil moddalar uchun tozalash effektlari har xil bo'ladi. tizimlari.Natijalar shuni ko'rsatdiCistanche deserticola polisakkaridi samarali ekzogen tabiiy antioksidant bo'lib, keyingi tadqiqotlar, ishlab chiqish va keng qamrovli foydalanishga loyiqdir..
Tubulosa sistanche 200 mg— Antiooksidlovchi
