TNBCda immunoterapiyani kuchaytirish uchun aptamerga asoslangan strategiyalar 2-qism

Bundan tashqari, aptamerlar maqsadli samaradorlikni, farmakokinetik profilni va biologik muhitda barqarorlikni yaxshilaydigan bir nechta kimyoviy modifikatsiyalarga toqat qiladilar, bu ularning in vivo ilovalari uchun zarurdir [47]. Boshqa joylarda [27,48] keng koʻlamda koʻrib chiqilganidek, aptamerlarga SELEX yoki post-SELEX paytida ularning nukleazalarga chidamliligini oshirish uchun qoʻllaniladigan eng koʻp qoʻllaniladigan modifikatsiyalar quyidagilarni oʻz ichiga oladi (3-rasm): OH guruhlarini almashtirish. ftor, metoksi, tiol yoki aminokislotalar bilan riboza; oligonukleotidlar uchlarini yopish yoki siklizatsiya qilish; fosfodiester umurtqa pog'onasini fosforotioat magistral bilan almashtirish; va qulflangan nuklein kislotalarning kiritilishi. Bundan tashqari, spigelmerlar deb ataladigan L-aptamerlar ishlab chiqarilishi mumkin, ular nukleazlar tomonidan tan olinmaydi, chunki ular tabiiy nuklein kislotalarning enantiomerlaridir. Kimyoviy modifikatsiyalar, shuningdek, polietilen glikol (PEG) yoki xolesterin kabi juda katta hajmli molekulalarni konjugatsiya qilish orqali kichik o'lchamli aptamerlarning tez buyrak filtratsiyasini bartaraf etish uchun qo'llaniladi, shu bilan ularning aylanish vaqtini maqsadga erishish imkoniyatiga ta'sir qilmasdan oshiradi. Kombinatsiyalangan terapiyada aptamerlarni ikkilamchi terapevtiklar bilan kimyoviy konjugatsiya qilish uchun murakkab yondashuvlar ham ishlab chiqilgan va eng qizig'i, ularning funksionalligini kengaytirish va nuklein kislotalarda kimyoviy xilma-xillikni bartaraf etish uchun aptamer molekulasiga ekzotik kimyoviy guruhlarni kiritish uchun innovatsion strategiyalar o'rganilgan [49] ].

Nukleazlar RNK yoki DNKning gidroliz reaktsiyasini tezlashtiradigan va keng biologik funktsiyalarga ega bo'lgan fermentlarni nazarda tutadi. Immunitet tizimida nukleazlar virusli infektsiyalarni aniqlash va tozalash uchun muhim vositadir. Virus hujayrani yuqtirgandan so'ng, u hujayra ichiga RNK yoki DNKni chiqaradi. Ushbu nuklein kislota molekulalari infektsiyalangan hujayraning yadrosi tomonidan tan olinadi va gidrolizlanadi, shu bilan virusning ko'payishi va infektsiya tarqalishining oldini oladi.

Bundan tashqari, nukleazlar tug'ma va adaptiv immunitet reaktsiyalarini tartibga solishda ham ishtirok etadi. Nukleazlar RNK yoki DNKning degradatsiyasi va barqarorligini tartibga solish orqali gen ekspresyon darajasini tartibga solishi mumkin. Immunitet hujayralarida nukleazlar apoptoz, antigen taqdimoti va T-hujayralarining differentsiatsiyasi kabi immunitet reaktsiyalarini tartibga soladi.

Umuman olganda, nukleazlar immun javobda muhim rol o'ynaydi, virusli infektsiyani tan oladi, gen ekspressiyasini modulyatsiya qiladi va immun javobini modulyatsiya qiladi. Shunday qilib, immunitetga ta'sir qilishning ko'plab mexanizmlari mavjud. Shu nuqtai nazardan, immunitetni yaxshilashga e'tibor berish kerak. Cistanche immunitetni oshiradi. Cistanche turli xil antioksidant moddalarga boy, masalan, vitamin C, vitamin C, karotenoidlar va boshqalar. Bu ingredientlar erkin radikallarni olib tashlashi, oksidlovchi stressni kamaytirishi va immunitetni yaxshilashi mumkin. immunitet tizimining qarshiligi.

Cistanche tubulosa afzalliklarini bosing

Aptamerlarning bog'lanish yaqinligini, maqsadli selektivligini va in vivo biologik mavjudligini yaxshilashning yana bir strategiyasi asta-sekin o'zgartirilgan aptamerlarni (SOMAmerlar) yaratish bilan ifodalanadi. Bular DNK aptamerlari bo'lib, uridinning 5-pozitsiyasida funksionallashtirilgan kimyoviy modifikatsiyalangan nukleotidlarga ega bo'lib, ular nafaqat maqsadli oqsil bilan o'zaro ta'sir qilishda ishtirok eta olmaydi, balki yangi ikkilamchi va uchinchi darajali strukturaviy motivlarni hosil qiladi, ular kirish mumkin bo'lgan maqsadlar repertuarini sezilarli darajada oshiradi. aptamerlarga [50].

Bugungi kunga kelib, qon tomir endotelial o'sish omilining 165-izoformasiga yo'naltirilgan, kimyoviy jihatdan o'zgartirilgan bitta aptamer (Makugen nomi) yoshga bog'liq makula naslini davolash uchun tasdiqlangan va o'n bitta aptamer insonning turli kasalliklarini davolash uchun klinik sinovlarda. [51,52]. Ular orasida anti-nukleolin AS1411 aptamer va anti-stromal hujayradan olingan omil 1 NOX-A12 aptamer allaqachon saraton terapiyasi uchun II bosqich klinik sinovlarini yakunlagan. Bundan tashqari, 68 Ga bilan belgilangan proteinga qarshi tirozin kinaz-7 Sgc8 DNK aptameri kolorektal bemorlarda uning diagnostik qiymatini baholash uchun I bosqichda (ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03385148).

3. TNBC davolash uchun aptamerga asoslangan immunitet strategiyalari

Saraton hujayralarida genetik va epigenetik mutatsiyalar o'simta bilan bog'liq bo'lgan ko'plab antigenlarning mavjudligiga olib keladi, ularni IS o'z-o'zidan tan olmaydi va shuning uchun mutatsiyaga uchragan hujayralarni yo'q qiladi. Biroq, saraton hujayralari immunitetni yo'q qilishdan qochish va atrofdagi mikro muhitni o'z foydasiga o'zgartirish uchun bir nechta mexanizmlarni ishlab chiqishi, bu o'simta o'sishi, invaziyasi va metastaziga olib kelishi yaxshi ma'lum (53 55].

Saraton immunoterapiyasining maqsadi ISning o'smalardan qochish va immun javobini bostirish mexanizmlarini yengish orqali saraton hujayralarini aniqlash va yo'q qilish qobiliyatini oshirish yoki tiklashdir. So'nggi bir necha yil ichida TNBCda o'smaga qarshi holatni tiklash uchun aptamerga asoslangan ajoyib strategiyalar ishlab chiqilgan. Quyida muhokama qilinganidek, ortib borayotgan dalillar aptamerning immun hujayralarining sitotoksik faolligini kuchaytirish, immun nazorat nuqtalarini bloklash yoki immun hujayralarni saraton hujayralariga jalb qilish qobiliyatini ko'rsatadi (4-rasm).

3.1. O'simta infiltratsiya qiluvchi limfotsitlar

TNBC mikro muhitidagi immun hujayralarining asosiy turlari TILlar bo'lib, ularning mavjudligi erta bosqichda davolanmagan o'smalari bo'lgan bemorlarda yaxshi omon qolish natijalari bilan sezilarli darajada bog'liqdir [56]. TILlar barcha CD3 plyus T hujayralarini o'z ichiga oladi, ular o'smaning yo'q qilinishini (CD8 plyus sitotoksik T hujayralari) va o'smaga qarshi javobni (CD4 plus T-helper 1) yoki o'simtaga qarshi immun javoblarni cheklashi mumkin (CD4 plus T-helper 2, shu jumladan Forkhead box P3 (). FOXP3), CD4 va tartibga soluvchi T hujayralari).

Yaqinda Zhao va boshqalar. saraton immunoterapiyasida antitumor reaktsiyasini kuchaytirish uchun aptamerlarning "super sitotoksik T-limfotsit" yaratish uchun maqsadli qobiliyatidan foydalanadigan original strategiyani taklif qildi [59]. Ular perforin va granzim B, CD8 plus T hujayralari lizosomalari tarkibidagi ikkita o'smaga qarshi toksinlar bilan to'ldirilgan va lizosomadagi CD63 retseptoriga mo'ljallangan aptamer bilan funktsionallashtirilgan kislota bilan parchalanadigan metall-organik asosli va lizosomaga mo'ljallangan nanozarrachalarni hosil qildilar. Ca2 plus uning biologik mosligi va barqarorligini yaxshilash va toksin faolligini oshirish uchun nano platformaga yotqizildi. Mualliflar lizosomalarning CD8 plus T hujayralarining sitotoksik tarkibini boyitish uchun aptamer tomonidan boshqariladigan platformadan (LYS-NP deb nomlangan) foydalanishga muvaffaq bo'lishdi.

TNBC 4T1 sichqoncha modelida sinovdan o'tkazilganda, T hujayralari qayta ishlangan 4T{3}}o'ziga xos antigenlar bilan oldindan faollashtirildi va LYS-NPs tomonidan rekombinatsiya qilindi va lizosomal tarkibni immunologik sinapslarga chiqarib yubordi, bu kuchli antitumor reaktsiyasini qo'zg'atdi (4-rasm). Taklif etilayotgan aptamer asosidagi immunoterapiya, asosan kuchli immunosupressiv signallar bilan ifodalangan qattiq o'smalari uchun T-hujayrali immunoterapiyada sezilarli qiyinchiliklarni yengib o'tish uchun katta imkoniyatlarga ega, bu esa T-hujayralarining past faollashuviga va sitotoksik oqsillarning sintezi va chiqarilishining pasayishiga olib keladi [60].

3.2. Immunitetni nazorat qilish nuqtasini ifodalovchi hujayralar

Alatrash guruhi TNBC bilan og'rigan bemorlarda PD-L1 genining ifodasi TNBC bo'lmaganlarga qaraganda ancha yuqori ekanligini ma'lum qildi (19).PD-L1, asosiy o'simta hujayralari bilan bog'liq immun nazorat nuqtalaridan biri, turli xil immun hujayralarida ifodalangan. , masalan, makrofaglar, ba'zi faollashtirilgan T hujayralari, B hujayralari va ko'plab qattiq o'simta hujayralarida, shu jumladan BC hujayralarida.Uning retseptorlari transmembran oqsili PD-1, TILlar, NK hujayralari, makrofaglar membrana yuzasida, dendritik hujayralar va monotsitlar [61]. PD-L1 va PD-1 o'rtasidagi bog'lanish CD8 plus TILlarning inhibisyoniga olib keladi va ularni anergik shaklga aylantiradi va natijada saraton immunitetidan qochishga olib keladi.

Bundan tashqari, PD{0}}/PD-L1 o'qi o'simta hujayralari ichida PI3K/AKT, MAPK va JAK/STAT [62] kabi turli proliferativ va omon qolish signalizatsiya yo'llarini modulyatsiya qiladi va eng muhimi, TNBCda faollashuv. Ushbu o'q epiteliya-mezenximal o'tishni (EMT) rag'batlantiradi, bu fenotip juda agressiv va metastatik o'smalar bilan bog'liq [63].

PD-1/PD-L1 effektlarini qaytarish uchun TNBCda turli xil aptamerga asoslangan yondashuvlar hozirda o'rganilmoqda (5-rasm).

Shakl 5. TNBCda PD-1/PD-L1 o'qini blokirovka qilish uchun aptamerga asoslangan strategiyalarning sxematik ko'rinishi. (a) anti-PD-L1 siRNK bilan yuklangan TNBC aptamer bilan bezatilgan nanozarrachalar; (b) doksorubitsin va anti-IDO1 siRNK bilan yuklangan anti-CD44 va antiPD-L1 aptamer bilan bezatilgan lipozomalar; (c) paklitaksel bilan konjugatsiyalangan antiPD-L1 aptamer; (d) anti-EGFR aptameri anti-PD-L1 yoki anti-CTLA-4 mAbs bilan kovalent bog'langan (batafsil ma'lumot uchun matnga qarang). BioRender.com bilan yaratilgan (2023-yil 2-martda kirilgan).

Shu nuqtai nazardan, bizning guruhimiz birinchi marta TNBC da Gint4.T deb nomlangan anti-trombotsitlardan kelib chiqadigan o'sish omili retseptorlari (PDGFR) aptamer bilan anti-PD-L1 mAb o'rtasidagi kombinatsiyani tekshirdi [64]. Gint4.T nukleazalarga chidamli 20 -ftorpirimidinlarga (20F-Py) RNK aptameri boʻlib, u insonning turli saraton hujayralari, shu jumladan TNBC hujayralari [65] va TNBC TME komponentlari, shu jumladan, yuzasida ifodalangan PDGFR bilan bogʻlanadi va uni inhibe qiladi. mezenximal ildiz hujayralari [66] va T hujayralari [64]. Qizig'i shundaki, TNBC 4T1 singenik sichqonlariga vena ichiga yuborilganda aptamer o'simta hujayralari va TME komponentlariga ta'sir qilib, o'simta o'sishi va o'pka metastazlarining shakllanishini inhibe qilishda antiPD-L1 mAb ta'sirini kuchli kuchaytiradi [64].

Bundan tashqari, PDGFR va PD-L1 ning qo'shma blokadasi FOXP3 plyus Treg hujayralarining kamayishiga va CD8 plyus T hujayralari va granzim B ning yagona monoterapiyadan ko'ra izchil ko'payishiga olib keladi. Ushbu natijalar Gint4.T aptameriga kovalent bog'langan anti-PD-L1 antikoridan tashkil topgan bispesifik immunokonjugatni yaratish uchun asos yaratadi va shu bilan kombinatsiyalangan terapiya samaradorligini optimallashtiradi. Anti-epidermal o'sish omili retseptorlari (EGFR) 20F-Py RNK aptamerini anti-PD-L1 (10_12) [67] yoki anti-CTLA-4 (ipilimumab) immunomodulyatorlari bilan kovalent bog'lash orqali olingan bispesifik konstruktsiyalar [68] mAblar Passariello va boshqalar tomonidan yaratilgan. va ikkala ota-ona qismining biologik funktsiyalarini saqlab turishi isbotlangan, shuning uchun BC hujayralariga qarshi kuchli sitotoksik faollik ko'rsatadi.

PD-L1ni nishonga olish uchun anti-PD-L1 mAb-larga alternativ strategiya genlarni o'chirish orqali PD-L1 ni bostirish bilan ifodalanadi, bu mAbs-ga asoslangan muolajalarning vaqti va narxi kabi takrorlanuvchi to'siqlarini engib o'tishga qodir. -iste'mol qilinadigan ishlab chiqarish, immunogenlik potentsiali va past barqarorlik. Bundan tashqari, ushbu strategiya sitoplazmatik PD-L1 ning ichki pro-tumorogen rolini blokirovka qilishga imkon beradi [69], buning o'rniga antikorlar tomonidan erishilmaydi. Saraton hujayralariga mo'ljallangan aptamerlarni funktsional guruhlari bilan ularning ekstremal qismlarida sintez qilish, nano-vektorlarga konjugatsiya qilish imkoniyati, ayniqsa, o'simtaga, nano-vektorga yuklangan kichik interferent RNK (siRNK) yuklarini etkazib berish uchun ajoyib yondashuvdir. , shu tariqa siRNKlarning nukleazlarga nisbatan zaifligini va ularning maqsadli hujayralarga kira olmasliklarini bartaraf etish. So'nggi paytlarda poli(laktik-ko-glikolik)-blok-PEG (PLGAb-PEG) asosidagi nanozarrachalar anti-PD-L1 siRNK bilan yuklangan va TNBC hujayralariga maxsus bog'lash va ichki singdira oladigan 20F-Py RNK aptameri bilan bezatilgan. [70,71].

Olingan aptamer-konjugatsiyalangan nanovektorlar TNBC hujayralarida 90 daqiqa inkubatsiyadan so'ng siRNKni maqsadli hujayralarga samarali etkazib berdi, bu esa PD-L1 ifodasini deyarli to'liq bostirishga qodir edi [72]. Shunisi e'tiborga loyiqki, aptamer bilan bezatilgan nanotashuvchilar turli ligandlarni NP yuzasiga bog'lash imkoniyatini taklif qiladi, shu bilan maqsadning o'ziga xosligini oshiradi va NPlarda bir nechta terapevtiklarni o'z ichiga oladi, bu esa samarali kombinatsiyalangan terapiyaga imkon beradi. Masalan, biz TNBC aptamerlari bilan jihozlangan PLGA polimer nanopartikullari tomonidan sisplatin [40] va siPD-L1 [72] ni bir vaqtda qo‘llash nafaqat toksik yon ta'sirlarni kamaytirishga yordam beradi, balki sisplatinning bildirilgan salbiy ta'siriga ham qarshi turishi mumkin. PD-L1 va immundan qochadigan TNBC hujayralarini boyitish bo'yicha ma'muriyat [73].

Shu munosabat bilan Kim va boshqalar. TNBCda sinergik kimyoimmunoterapiya uchun lipozomalarning tashqi yuzasida konjugatsiyalangan ikkita DNK aptamerlari va nanovektorlar ichidagi ikkita turli terapevtik vositalarga ega bo'lgan ko'p funktsiyali nanosistema tayyorladi [74]. Xususan, ular TNBC hujayralarini nishonga olish uchun avval tanlangan anti-CD44 [75] va anti-PD-L1 [76] DNK aptamerlaridan foydalanganlar, ularning har biri tiol bilan o'zgartirilgan va tiol-maleimid tomonidan PEGillangan DSPE misellarining maleimid guruhlariga kovalent konjugatsiyalangan. kimyo. Nano o'lchamli lipozomalar doksorubitsin va siRNK bilan to'ldirilgan, bu IDO1, immunosupressiv TME ni qo'llab-quvvatlaydigan va doksorubitsin bilan davolash orqali tartibga solinadigan oqsilning ifodalanishiga xalaqit beradi. TNBC 4T1 o'simta-ksenograft sichqonlariga tomir ichiga yuborilganda, nano-vektorlar saraton hujayralariga mo'ljallangan immunogen hujayralar o'limini induksiyalash va immunosupressiyani qaytarishni sinergik tarzda birlashtirib, o'simta o'sishini sezilarli darajada kamaytirdi va metastaz shakllanishini inhibe qildi [74].

Yaqinda turli xil PD-L1 aptamerlari mustaqil antagonistlar, bispesifik konjugatlar va o'pka, jigar va yo'g'on ichak o'simtasi sichqoncha modellarida terapevtik vositalarni etkazib berish agentlari sifatida ishlab chiqarilgan va sinovdan o'tgan, ular PD-L1 antikorlariga o'xshash antikorlarga xalaqit beradi. PD-1/PD-L1 o'qi PD-L1 ni blokirovka qilish orqali (2-jadval). XQ-P3 nomli bitta aptamer MDA-MB-231 xujayralarini ortiqcha ifodalovchi PD-L1 ustidagi ijobiy tanlov natijasida PD-L1 nokaut hujayralarini qarshi tanlash uchun ishlatgan holda yaratilgan [77]. Hali in vivo sinovdan o'tkazilmagan bo'lsa ham, u TNBC MDA-MB-231 hujayralari va immun Jurkat hujayralarining kokulturalarida PD-1 bilan o'zaro ta'sirini blokirovka qilish va T hujayralari funksiyasini tiklash orqali yuqori samarali ko'rinadi. Bundan tashqari, XP-Q3 aptamer-paklitaksel konjugati PD-L1 haddan tashqari ifodalangan TNBC hujayralarida proliferatsiyaga qarshi samaradorlikni ko'rsatdi [77].

3.3. Makrofaglar

O'simta bilan bog'langan makrofaglar (TAMlar) keng ko'lamli saraton kasalliklarining TME dagi eng ko'p tarqalgan immun hujayralaridan biri bo'lib, o'smaga qarshi immun javoblarni rag'batlantirish yoki bostirish uchun harakat qilishi mumkin [86,87]. Haqiqatan ham, yuqori darajadagi plastisitivligi tufayli ular turli xil mikro-atrof-muhit stimullariga javoban ikkita turli xil fenotiplarga o'tadilar: klassik faollashtirilgan, yallig'lanishga qarshi M1 va muqobil ravishda faollashtirilgan yallig'lanishga qarshi M2, ular hujayra yuzasi markerlariga differentsial ekspressiya profillarini ko'rsatadilar. turli xil sitokin va kimyokin ishlab chiqarish. M1 makrofaglari odatda o'smaga qarshi funktsiyalarni bajaradi, M2 makrofaglari esa o'simta rivojlanishiga yordam beradi. Ko'pgina tajovuzkor o'smalarda, shu jumladan TNBCda, TAMlar odatda an'anaviy terapiya va immunitetni nazorat qilish punktini inhibe qilish terapiyalarining muvaffaqiyatsizligi uchun M{9}}o'xshash fenotipga o'xshaydi. Shu sababli, bir nechta innovatsion immunoterapevtik yondashuvlar M2 makrofaglarini yo'q qilishga va ularni kerakli fenotipga qayta dasturlashga qaratilgan [88,89].

M{0}}odamga o‘xshash makrofaglarga mo‘ljallangan aptamerlarni tanlash uchun birinchi hujayra-SELEX yondashuvi bir nechta donorlarning monotsitlaridan olingan va M{2}}o‘xshash fenotipga qutblangan inson makrofaglariga qo‘llanildi [90]. Tanlovdan olingan eng yaxshi M2-maqsadli DNK aptameri maqsadli hujayralarni ajratilmagan M0-va monotsitlardan ajrata olmasa ham, M1-oʻxshashlarga ham pastroq bogʻlangan boʻlsa-da. Makrofaglar, u tezda CD14 va monotsitlarga o'z ichiga oladi va shu tariqa monositlarga mo'ljallangan dori vositalarini yuborish imkoniyatlarini saqlab qoladi.

Qattiq o'sma immunoterapiyasi uchun aptamerlarning yana bir ajoyib qo'llanilishi o'simta hujayralari uchun M1 makrofaglarning o'ziga xosligini oshirish, ularni saraton hujayralariga mo'ljallangan aptamerlar bilan ishlab chiqishdan iborat. Bemorlarga CAR-T hujayralarini kiritadigan kimerik antigen retseptorlari T (CAR-T) hujayrali immunoterapiya ba'zi leykemiyalar va limfomalarni davolashda katta samaradorlikni ko'rsatdi, ammo o'smalarning kirib borishi qiyinligi tufayli qattiq o'smalarda oddiy natijalar [91] . Makrofaglarning o'simta to'qimalariga kirish qobiliyati tufayli yaqinda ularni o'simta hujayralarini nishonga olish uchun kimerik CAR (CAR-M) ni ifodalash va maqsadli antitumor reaktsiyasini boshlash uchun genetik muhandislik qilish uchun bir nechta yondashuvlar taklif qilindi [92]. An'anaviy CAR-M terapiyasi bilan bog'liq bo'lgan katta kamchiliklarni, masalan, ishlab chiqarilgan oqsillarning past takrorlanishi va xavfsizlik muammolarini bartaraf etish uchun Qian va boshqalar. aptamerlardan foydalanishga asoslangan yangi CAR-M yondashuvini taklif qildi [93].

Sichqoncha barqaror makrofag hujayra liniyasi, RAW 264.7, M1 hujayra yuzasida azido shakar hosil qilish uchun azid o'z ichiga olgan metabolik glikoprotein yorliqlash reagenti va lipopolisakkarid bilan inkubatsiya qilindi. Keyin M1 hujayralari bir vaqtning o'zida o'simtani nishonga olish va immun nazorat nuqtasi blokadasi uchun bir nechta saraton hujayralarida ifodalangan nukleolin bilan bog'langan AS1411 aptameriga va PD-L1 aptameriga bosish kimyoviy reaktsiyasi orqali konjugatsiya qilindi. Muhimi, in vivo jonli ravishda, 4T1 TNBC ga ega bo'lgan va M1 hujayralari bilan tomir ichiga yuborilgan, floresan aptamerlar bilan ishlaydigan sichqonlarning tasviri o'zgartirilmagan M1 hujayralari bilan solishtirganda o'smalarda ko'proq to'planishini ko'rsatdi. Bundan tashqari, o'smaga qarshi faollik uchun sinovdan o'tkazilganda, dual-aptamer tomonidan ishlab chiqilgan M1 o'simta o'sishi va metastaz shakllanishining kuchli pasayishiga olib keldi, bu o'simtada T hujayralari infiltratsiyasining kuchayishi va T hujayralarining sitotoksikligining kuchayishi bilan immun TMEni qayta dasturlash bilan birga keldi.

Shu bilan bir qatorda, Chen va boshqalar. taklif qilingan polivalent sferik aptamerlar (PSA) makrofag muhandislik strategiyasi sifatida [94]. PSAlar oltin nanozarrachalarni tiol bilan o'zgartirilgan AS1411 aptamer va erkin ekstremitada M{3}} makrofaglarda hosil bo'lgan azid teglari bilan reaksiyaga kirishish uchun yuqorida aytib o'tilgan metabolik jarayonlar orqali ishlaydigan DNK bog'lovchisi bilan funksionallashtirish orqali hosil qilingan. yorliqlash va biortogonal bosish reaktsiyalari (6-rasm). Dizaynlangan qutblanmagan makrofaglarning M1 kichik turiga fenotipik o'zgarishi in vitro rentgen nurlari bilan faollashtirilgan va 4T1 o'simta ksenograftlari bo'lgan sichqonlarda tasdiqlangan, tizimli toksiklik belgilarisiz kuchli o'simtaga xos o'limga sabab bo'lgan.

3.4. Tabiiy qotil hujayralar

NK hujayralari tug'ma ISga tegishli bo'lgan sitotoksik limfotsitlar bo'lib, yallig'lanish sitokinlari va kimokinlarni ishlab chiqarishga qodir. Ular "birinchi himoya chizig'i" deb ataladi, chunki T-limfotsitlardan farqli o'laroq, ular antigenga xos T-hujayra retseptorlarini ifoda etmaydi, balki mutatsiyaga uchragan hujayralarga oldindan sezuvchanlik yoki klonal kengayishsiz ta'sir qiladi [95]. NK hujayralarini qabul qiluvchi immunoterapiya, qisman immunosupressiv TME va o'simtaga NK hujayralarining o'ziga xosligi yo'qligi sababli qattiq o'smalarni davolashda samaradorlikni ko'rsata olmadi [96].

Shu sababli, NK hujayralarining saratonga qarshi terapevtik samaradorligini oshirishga qaratilgan yondashuvlar orasida katta sa'y-harakatlar CARlarni ifodalash yoki o'simtani nishonga oluvchi ligandlarni konjugatsiya qilish orqali saraton o'ziga xosligini ta'minlashga qaratilgan [97]. Zu va uning hamkasblari aptamerlarni lenfoma hujayralarida CD30 retseptorlarini aniq taniy oladigan aptamerni NK tijorat hujayra liniyasi yoki uchta sog'lom donordan olingan NK hujayralari yuzasiga bog'lash orqali faol saratonga qarshi vosita sifatida o'rganishdi [98]. Ushbu DNK tipidagi aptamer ilgari xuddi shu guruh tomonidan gibrid SELEX yondashuvi orqali tanlangan, unda CD30 plyus lenfoma hujayralarida tanlash bosqichlari CD30 rekombinant oqsilida tanlash bosqichlari bilan kuzatilgan [99]. Aptamer 30 uchida lipofil qo'sh C18 uglevodorod zanjirlari bilan NK hujayralarining membranasiga mahkamlash uchun o'zgartirildi, ular ularni o'ldirish uchun maxsus limfoma hujayralariga yo'naltiriladi [98]. Yaqinda xuddi shu mualliflar TNBC hujayralarida ifodalangan hali ma'lum bo'lmagan oqsilni NK hujayralari yuzasiga bog'lashga qodir bo'lgan DNK aptamerini biriktirish orqali TNBCda xuddi shunday yondashuvni qo'lladilar. Aptamer tomonidan ishlab chiqilgan NK hujayralari oddiy to'qimalarga toksik ta'siri bo'lmagan sichqonlarga tomir ichiga yuborilgan MDA-MB-231 hujayralaridan o'pka metastazini inhibe qildi [100].

Qattiq o'smalarda NK hujayralarining o'simtaga xosligini yanada oshirish uchun gepatotsellyulyar karsinoma hujayralariga mo'ljallangan aptamer va AptPD-L1 aptamer yordamida ikkita aptamer bilan jihozlangan NK hujayralari yaratildi [81]. Olingan muhandislik NK hujayralari asrab olingan sichqonlarda gepatotsellyulyar karsinoma o'sishini inhibe qilishda ikkita aptamerdan faqat bittasi bilan konjugatsiyalanmagan yoki konjugatsiyalangan hujayralarga qaraganda samaraliroq edi. NK hujayralari bilan immunoterapiya samaradorligining yana bir chegarasi ularning qattiq shishlarda etarli darajada infiltratsiyasidir. Yana bir bor aptamerlar bu muammoni engish uchun ajoyib vosita ekanligini isbotladi. Xok guruhi bir vaqtning o'zida bir nechta o'simta hujayralarida yuqori darajada ifodalangan c-Met retseptoriga va NK hujayralarida ifodalangan Fcg retseptorlari III (CD16a) ga bir vaqtning o'zida bog'lana oladigan bispesifik aptamerga asoslangan konjugat hosil qildi [101]. Konjugat ikkita yuqori o'ziga xos c-Met va CD16a DNK aptamerlaridan tashkil topgan bo'lib, ular turli bog'lovchilar tomonidan birlashtirilgan va ikkita retseptorga bir vaqtning o'zida bog'lanish uchun ~ 65 Å ideal masofani saqlagan. Konjugat NK hujayralarini saraton hujayralariga jalb qilish orqali antikorga bog'liq hujayrali sitotoksiklikni samarali taqlid qila oldi. Keyinchalik, xuddi shu CD16 aptameri PD-L1 DNK aptameriga NK hujayralarini PD-L1 va o'simta hujayralariga jalb qilish va TILlarni qayta faollashtirish orqali PD-1/PD-L1 immunosupressiv o'qini buzishga qodir bo'lgan konstruktsiyani yaratish uchun birlashtirildi. o'simtali sichqonlarda o'simta hujayralariga qarshi [82]. Ushbu yondashuv, ayniqsa, TNBC kabi PD-L1 darajasi yuqori bo'lgan qattiq o'smalar uchun ko'rsatiladi.

4. Xulosalar

Bu erda muhokama qilingan so'nggi tadqiqotlar oligonükleotid aptamerlarining saraton kasalligiga qarshi kurashish uchun ISni kuchaytirish uchun katta salohiyatini aniq ko'rsatib beradi. Aptamerlar mAbs kabi saratonga qarshi vositalar sifatida ishlatilishi mumkin, ammo arzonroq, tezroq ishlab chiqariladi va ko'proq qayta ishlab chiqariladi va antikorlarga qaraganda kamroq immunogendir. Shu bilan birga, aptamerlarning klinikaga kelishi kutilganidan sekinroq ekanligini tan olish kerak; aslida, birinchi SELEX [25,26] dan beri 30 yildan ortiq vaqt o'tgan bo'lsa-da, hozirda faqat uchta aptamer saraton kasalligini davolash uchun klinik sinovlarda [51].

Bu pasayish asosan aptamerlarning bemorlarda samaradorligini cheklaydigan ba'zi muammolar, masalan, ularning barqarorligi va yarimparchalanish davrining noaniqligi, ayniqsa o'simtani o'rab turgan murakkab va doimiy o'zgarib boruvchi mikro muhitda yuzaga keladi. Shunga qaramay, so'nggi yillarda yuqorida aytib o'tilgan cheklovchi muammolarni bartaraf etish uchun ishlab chiqilgan hayratlanarli strategiyalar va so'nggi paytlarda aptamer kashfiyoti va ularni istalgan ilovalarga moslashtirish bo'yicha o'zgartirishlar aptamerlardan amaliyotda foydalanish tez orada bo'lishini ta'kidlashni asosli qiladi. zudlik bilan yangi terapevtik variantlarga muhtoj bo'lgan TNBC kabi saraton kasalliklari uchun amalga oshirilishi mumkin.

Muallif hissalari:

Konseptualizatsiya, LC; yozish - asl qoralama tayyorlash, LC; yozish — LA, Ad, RN, MF, SC va LC ni ko'rib chiqish va tahrirlash Barcha mualliflar qo'lyozmaning nashr etilgan versiyasini o'qib chiqdilar va rozi bo'ldilar.

Moliyalashtirish:

Ushbu tadqiqot Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052 tomonidan moliyalashtirildi, LCLA uchun Italiya uchun AIRC stipendiyasi tomonidan qo'llab-quvvatlandi.

Institutsional nazorat kengashi bayonoti:

Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Ma'lumotlar mavjudligi to'g'risidagi bayonot:

Qo'llanilmaydigan, qo'llab bo'lmaydigan.

Minnatdorchilik:

Biz A.Kaliendoga chuqur munozaralar uchun minnatdormiz.

Manfaatlar to'qnashuvi:

Mualliflar manfaatlar to'qnashuvi yo'qligini e'lon qilmaydi.

Ma'lumotnomalar

1. Dent, R.; Tryudo, M.; Pritchard, KI; Xanna, WM; Kan, HK; Sawka, Kaliforniya; Likli, LA; Rawlinson, E.; Quyosh, P.; Narod, SA Uch salbiy ko'krak saratoni: klinik xususiyatlar va takrorlanish shakllari. Klin. Saraton Res. 2007, 13, 4429–4434. [CrossRef]

2. Deraxshon, F.; Reis-Filho, JS Uch salbiy ko'krak saratoni patogenezi. Annu. Rev. Patol. 2022, 17, 181–204. [CrossRef]

3. Lu, JY; Alvares Soto, A.; Anampa, JD. Erta bosqichdagi uch marta salbiy ko'krak saratoni uchun tizimli terapiya manzarasi. Ekspert fikri. Farmakoter. 2022, 23, 1291–1303. [CrossRef]

4. Lemann, BD; Bauer, JA; Chen, X.; Sanders, ME; Chakravarthy, AB; Shyr, Y.; Pietenpol, JA Insonning uch marta salbiy ko'krak bezi saratoni subtiplarini aniqlash va maqsadli davolash usullarini tanlash uchun preklinik modellar. J. Klin. Tekshirish. 2011, 121, 2750–2767. [CrossRef]

5. Lemann, BD; Yovanovich, B.; Chen, X.; Estrada, MV; Jonson, KN; Shyr, Y.; Muso, HL; Sanders, ME; Pietenpol, JA Uch salbiy ko'krak bezi saratoni molekulyar pastki turlarini takomillashtirish: Neoadjuvant kimyoterapiyani tanlash uchun ta'sir. PLoS ONE 2016, 11, e0157368. [CrossRef]

6. Burstein, MD; Tsimelzon, A.; Poaj, GM; Kovington, KR; Kontreras, A.; Fuqua, SA; Savage, MI; Osborne, CK; Hilsenbek, SG; Chang, JK; va boshqalar. Keng qamrovli genomik tahlil uch salbiy ko'krak saratonining yangi subtiplari va maqsadlarini aniqlaydi. Klin. Saraton Res. 2015, 21, 1688–1698. [CrossRef]

7. Park, JH; Ahn, JH; Kim, SB Erta uch marta salbiy ko'krak saratonini (TNBC) qanday davolashimiz kerak: joriy standartdan yaqinlashib kelayotgan immuno-molekulyar strategiyalargacha. ESMO Open 2018, 3, e000357. [CrossRef]

8. Li, S.; Bao, C.; Huang, L.; Wei, JF Metastatik uch-salbiy ko'krak saratoni uchun hozirgi terapevtik strategiyalar: farmatsevtlar nuqtai nazaridan. J. Klin. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. An'anaviy saraton kimyoterapiyasining chegaralari. Onkologiyada dori vositalarini etkazib berishda: asosiy tadqiqotlardan saraton terapiyasiga; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, AQSh, 2011; 1-jild, 1–31-betlar.

10. Ferrari, P.; Skatena, C.; Gilli, M.; Bargagna, I.; Lorenzini, G.; Nikolini, A. Kimyoterapiyaga chidamli TNBC uchun molekulyar mexanizmlar, biomarkerlar va rivojlanayotgan terapiya. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonsales-Angulo, AM; Timms, KM; Liu, S.; Chen, H.; Litton, JK; Potter, J.; Lanchbury, JS; Stemke-Xeyl, K.; Hennessy, BT; Arun, BK; va boshqalar. BRCA mutatsiyalarining uch marta retseptorlari-salbiy ko'krak saratoni bo'lgan tanlanmagan bemorlarda tarqalishi va natijalari. Klin. Saraton Res. 2011, 17, 1082–1089. [CrossRef]

12. Robson, M.; Im, SA; Senkus, E.; Xu, B.; Domchek, SM; Ma'suda, N.; Delalog, S.; Li, V.; Tung, N.; Armstrong, A.; va boshqalar. Germline BRCA mutatsiyasiga ega bo'lgan bemorlarda metastatik ko'krak saratoni uchun Olaparib. N. Engl. J. Med. 2017, 377, 523–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eykesdal, HP; Yndestad, S.; Elzavari, A.; Llop-Gevara, A.; Gilje, B.; Blix, ES; Espelid, H.; Lundgren, S.; Geysler, J.; Vagstad, G.; va boshqalar. Olaparib monoterapiyasi tanlanmagan uch salbiy ko'krak saratonida asosiy davolash sifatida. Ann. Onkol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litton, JK; Rugo, HS; Ettl, J.; Hurvitz, SA; Gonsalves, A.; Li, KH; Fehrenbaxer, L.; Yerushalmi, R.; Mina, LA; Martin, M.; va boshqalar. Talazoparib rivojlangan ko'krak bezi saratoni va BRCA mutatsiyasiga ega bemorlarda. N. Engl. J. Med. 2018, 379, 753–763. [CrossRef]

15. Keung, MY; Vu, Y.; Badar, F.; Vadgama, QK Ko'krak bezi saratoni hujayralarining PARP inhibitörlerine javobi BRCA holatidan mustaqil. J. Klin. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com