Leptospirozli buyrak kasalligida mikro o'tish Ⅱ

4. Leptospira spp ga xos immunitet javoblari.

Leptospiraning asosiy yo'li shilliq pardalarga yoki ochiq teriga qon, to'qimalar, siydik yoki ifloslangan suv orqali to'g'ridan-to'g'ri kirib boradi, u butun tizimli qon aylanish tizimiga tarqaladi va bir nechta organlarga tarqaladi.jigar, o'pka va proksimal tubulabuyraklardagi nefron, bu erda u ko'payib, bir oy yashay oladi [51]. Infektsiyaning dastlabki bosqichidatug'ma immunitet reaktsiyasileptospirozda birinchi himoya chizig'i sifatida asosiy rol o'ynaydi, javobga ta'sir qiladinaqshni aniqlash retseptorlari, makrofag fagotsitozi, hujayradan tashqari induksiyaneytrofillarning to'planishi, vakomplement tizimining aralashuvi [52].

Theimmun javobodamlarda muhim rol o'ynaydiklinik belgilarning rivojlanishi, ba'zi patogen shtammlarning virulentlik omillari kabi. Odamlarda leptospirozning aksariyati asemptomatik yoki engildir va faqat 10% hollarda ko'p a'zolar etishmovchiligi va o'lim darajasining oshishi bilan og'ir shakllar rivojlanadi.sitokin bo'roniva immuno-falaj holati. Patogen turlar bakteriemiya bosqichida gumoral javobni rag'batlantiradi, garchi ularning keyingi harakatiimmun javobaniq emas. Leptospirozning ko'plab klinik ko'rinishlari bo'lgan bemorlarni o'rganishda klinik ko'rinishning og'irligi TNF-, IL-10 va IL-6 [53] kabi turli zardobdagi sitokinlar darajasi bilan bog'langan, ammo bu xulosa munozarali bo'lib qolmoqda [54]. Ushbu shartlar immunitetning umumiy reaktsiyasini va infektsiya paytida yuzaga keladigan biologik hodisalarni tushunishga qiziqishning ortishiga olib keldi.

CISTANCHE QANCHA VA QANCHA KETADI?

4.1. Leptospira va komplement tizimi

Leptospiral proteazlarning hujayradan tashqari matritsaga qarshi proteolitik faolligi infektsiyaning qon aylanish oqimiga kirishiga imkon beradi. Qon aylanish tizimidagi komplement tizimi patogen Leptospiraga tug'ma immunitet reaktsiyasining asosiy mexanizmlaridan biridir. Biroq, Leptospira proteinlarni komplement molekulalariga bog'lash va C3 oqsil zanjiriga ta'sir qiluvchi termostabil neytral metalloproteinaza fermenti bo'lgan termolizin kabi proteazlarni ishlab chiqarish orqali komplement tizimining hujumidan qochish strategiyalarini ishlab chiqdi. Patogen shtammlar H omilini (FH), komplement omil H bilan bog'liq protein 1 (FHR-1), H omiliga o'xshash protein 1 (FHL-1) va C4b bog'lovchi oqsilni (C4BP) bog'laydi, barchasi komplement tizimini inhibe qilish uchun javobgardir [55]. Xost komplement regulyatorlari, xost proteazasi va bakterial proteazaning aralashuvi orqali patogen Leptospira [55,56] dan komplementdan qochishning uchta asosiy strategiyasi mavjud. Komplement regulyatorlari uchun Leptospira C3 konvertazalarining parchalanishini tezlashtirish uchun H omil (FH; muqobil komplement yo'lining regulyatori) va C4 bog'lovchi oqsildan (C4BP; klassik va lektin komplement yo'llarining regulyatori) foydalanadi va shuningdek, I omil uchun kofaktor sifatida ishlaydi. C3b va C4b ning parchalanishi uchun [57,58]. Leptospiral oqsil (LcpA) vitronektin (Vn; terminal yo'l regulyatori) bilan birgalikda C9 ni bog'laydi va uning polimerizatsiyasini inhibe qiladi [59], shuning uchun membranani faollashtiruvchi kompleks (MAC) shakllanishini potentsial ravishda bloklaydi [60]. Bundan tashqari, patogen Leptospira Leptospira yuzasida C3b, C4b va C5 hazm qilish uchun faol plazmin [61] (serin proteaz) ni keltirib chiqaradigan Urokinaz tipidagi plazminogen aktivator (uPA) kabi bir nechta xost proteazlarini bog'laydi [62]. Bundan tashqari, metalloproteazlar va termolizin, endogen Leptospira proteazasi bir nechta komplement oqsillarini (C2, C3, C4 va B omil) parchalashi va faolsizlantirishi mumkin [60]. Xost va patogen Leptospiradan kelib chiqqan komplement regulyatorlarining kombinatsiyasi xostning maqsadli organlarida bakterial kolonizatsiyani osonlashtiradi [63].

4.2. Leptospiralar va neytrofillar

INFEKTSION paytida Leptospiraning patogen turlari neytrofillarning kuchli faollashuvini va yallig'lanishga qarshi javobni keltirib chiqaradi. Neytrofillar mikroorganizmlarni nazorat qilish uchun muhim ahamiyatga ega, ammo ular uy egasi to'qimalarining shikastlanishiga ham hissa qo'shadilar. Qon aylanishidagi past neytrofil faolligi tufayli hujayradan tashqari neytrofillar to'planishining past darajalari leptospiremiyani kuchaytiradi, bu esa neytrofillar to'planishining intravaskulyar shakllanishi patogen Leptospira [64] erta tarqalishining oldini olishda muhim bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.

4.3. Leptospiralar va makrofaglar

Leptospira infektsiyasining dastlabki bosqichida makrofaglar spiroxetani yo'q qilishda muhim rol o'ynaydi. Ushbu effektor mexanizm samarali sitokin reaktsiyasi bilan birgalikda fagotsitar nazorat va infektsiyaning tarqalishi bilan bog'liq, garchi Leptospira spp. Fas/FasL-kaspaz-8/-3 yo‘li orqali makrofaglarda apoptozni qo‘zg‘atishi hamda infektsiyalanganlarda mitoxondrial omilni qo‘zg‘atuvchi apoptoz va endonukleaza ajralishi tufayli ularning xostda omon qolishi va ko‘payishiga yordam berishi ko‘rsatilgan. makrofaglar [65]. RNK tomonidan transkripsiyadan keyingi tartibga solish kabi epigenetik mexanizmlarni aniqlash uchun Leptospira bilan kasallangan makrofaglarning mikro-transkriptomiyasi bo'yicha so'nggi tadqiqotlar o'tkazildi. Leptospira bilan kasallangan makrofaglar mikroRNKlar (miRNKlar) spiroxeta bilan infektsiya bilan tartibga solinishini ko'rsatdi va bu tartibga solish Leptospira infektsiyasiga immun tizimining ushbu hujayralarining javobida hayotiy muhimligini ko'rsatdi [66]. Inson makrofaglarida Leptospira infektsiyasi tomonidan ishlab chiqarilgan reaktiv kislorod turlari va lizosomal katepsin B vositachiligida yallig'lanishning faollashishi NLRP3 va IL-18 ning yuqori darajalariga ega bo'lib, IL-1 ishlab chiqarilishiga yordam beradi va yuqori darajaga olib keladi. fagotsitoz ehtimoli va leptospirozga chidamlilik bilan bog'liq bo'lgan ba'zi sitokinlarning tezkor modellanishi [67].

4.4. Leptospiraga gumoral javob

Leptospiraga qarshi o'ziga xos gumoral javob simptomlar paydo bo'lishining uchinchi kunida IgM va IgG antikorlarini ishlab chiqarish bilan tavsiflanadi. Bundan tashqari, IgA ishlab chiqarilishi birinchi kundan boshlab infektsiyadan keyingi to'qqizinchi oygacha qayd etilgan; Aslida, IgM ning oshishi leptospirozning erta tashxisida muqobil chora sifatida ishlatilgan [68]. Leptospirozli odamlarda gumoral reaktsiyaning ta'siri tabiiy infektsiyadan keyin serologik tashxis qo'yish imkonini beradi [69]. Leptospira infektsiyasida gumoral javobning eng muhim jihati himoya antikorlarining shakllanishi bo'lishi mumkin. Leptospirozga qarshi hozirda mavjud bo'lgan vaktsinalar to'liq hujayrali preparatlardan iborat bo'lib, past samaradorlik, ko'plab nojo'ya ta'sirlar, past immunitetli xotira hosil bo'lishi va serovar farqlardan o'zaro himoyalanishning etishmasligi kabi cheklovlarga ega. Shunday qilib, kasalliklarni nazorat qilish uchun yangi vaktsinalarni ishlab chiqish zarur va hozirda genetik immunizatsiyadan vaktsinalarni ishlab chiqarish bo'yicha tadqiqotlar olib borilmoqda [70]. Leptospira ning OMPlari antigen hisoblangan, B limfotsitlari uchun yaxshiroq immunogenlik xususiyatiga ega, ular tarkibiga OmpL187- 98, OmpL1173-191, OmpL1297-320, LipL4130-48, LipL{ tuzilish epitoplari kiradi. {9}} va LipL41263-282 [71]. Ushbu epitoplar universal vaksinani ishlab chiqish uchun istiqbolli nomzodlardir.

4.5. Leptospiraga adaptiv immun javob: T-hujayralar va sitokinlar

Leptospira ning patogen turlari T va B limfotsitlar vositachiligida immunitet reaktsiyasini keltirib chiqaradi, bu esa tortishish jadvallari bilan bog'liq bo'lishi mumkin bo'lgan sitokinlarning ifodasi bilan birga keladi. Leptospira bilan infektsiya paytida T hujayralarining faollashishi, asosan, sitokin ishlab chiqarish orqali yallig'lanish reaktsiyasini boshlaydi. Bu infektsiyani erta bartaraf etishda muhim ahamiyatga ega, ammo yallig'lanishga qarshi sitokinlarning nazoratsiz ishlab chiqarilishi, shuningdek, sitokinlarning ortiqcha ishlab chiqarilishiga olib kelishi mumkin, bu esa sepsis va ko'p organ etishmovchiligiga olib kelishi mumkin bo'lgan immuno-falaj holatiga olib kelishi mumkin. T-limfotsitlar IL-1, IL-6, IL-12, interferon (IFN)- va TNF- hosil qiladi, ular infektsiya joyida leykotsitlarni jalb qilish uchun kimyo-atraktantlar vazifasini bajaradi. Qizig'i shundaki, ex vivo, naif d T hujayralari Leptospira antijeni bilan rag'batlantirilgan periferik qon mononuklear hujayralari (PBMCs) kulturalarida ko'payib, IL{8}} va IFN [72] hosil qilgan. Bundan tashqari, leptospiroz bilan kasallangan yovvoyi tipdagi sichqonlar yuqmagan sichqonlarga nisbatan IL-4, IL-10 va IL-13 kabi sitokinlarning koʻp miqdorini koʻrsatgan boʻlsa, leptospiroz qoʻzgʻatgan surunkali sichqonlar nefrit (Daf1-/- sichqonlar) silliq mushak aktinini, IL-10, IL-13 yuqori ifodasini ko‘rsatdi, ammo IL-12 va IL{{21} orasida farq yo‘q. } darajalari [73]. Shunday qilib, Daf1 va IL-17 buyrak fibrozisi bilan Leptospira tomonidan qo'zg'atilgan murin CKD o'rtasidagi bog'liqlik sifatida CKD rivojlanishida hal qiluvchi himoya rolini o'ynashi mumkin [72,73]. Biroq, kasallikning rivojlanishida tanlangan sitokin reaktsiyasi haqidagi faraz hozirgacha inson leptospirozida noaniq. Og'ir leptospiroz va o'pka tutilishi bo'lgan bemorlarda engil leptospirozli bemorlar bilan solishtirganda IL{28}}, CXCL8 va IL-10 ning yuqori darajalariga erishildi [53]. Leptospirozli bemorlarda sitokinlarning yuqori konsentratsiyasi ularning og'ir leptospiroz rivojlanishidagi asosiy rolini ta'kidlaydi.

Og'ir infektsiyali bemorlarda yallig'lanishga qarshi profilga ega bo'lgan CD4+ T limfotsitlari va IL-2 va IFN- ishlab chiqaruvchilari, CD4+ CD25 esa IL-10 ishlab chiqaruvchilari yuqori bo'ladi. deyarli yo'q. T-limfotsitlar vositasida immunitet reaktsiyasining tartibga solinishi Leptospiraga yallig'lanish reaktsiyasi natijasida hosil bo'lgan to'qimalarning shikastlanishiga yo'l qo'ymaydi. Og'ir leptospirozli odamlarning CD4+ T-limfotsitlarida TNF- va boshqa yallig'lanishga qarshi sitokinlarning ishlab chiqarilishi kasallikning engil shakliga qaraganda yuqori, bu esa bu sitokinlar marker sifatida ishlatilishi mumkinligini ko'rsatadi. infektsiyaning immunologik bosqichidagi zo'ravonlik [74]. IL{12}} ishlab chiqarilishi leptospirozli odamlarda o'lim xavfi bilan bog'liq; ammo, ta'sirlangan va asemptomatik odamlarda o'tkazilgan tadqiqot bu sitokin ishlab chiqarishni yallig'lanish reaktsiyasi va omon qolish nazorati bilan bog'ladi [74]. Leptospira infektsiyasi paytida yallig'lanish vositachilari va ba'zi leykotsit hujayralarining ta'siri, masalan, T-limfotsitlar, leptospirozning og'ir shakllari bo'lgan odamlarda sodir bo'lganidan farqli o'laroq, chidamli odamlarda tezda tartibga solinadi.

Xulosa qilib aytadigan bo'lsak, leptospirozli bemorlarning bakterial genomning turli xil virulentlik omillari bilan o'zaro ta'siri tufayli Leptospira infektsiyasiga qarshi immunitet to'liq tushunilmagan, bu esa Leptospiraga mustahkam patogenlik qobiliyatini beradi.

5. Klinik ko'rinishlari

Leptospirozning klinik ko'rinishlari xilma-xil bo'lib, grippga o'xshash alomatlar (isitma, miyalji va bosh og'rig'i) kabi engil, o'ziga xos bo'lmagan alomatlardan tortib, oxirgi bosqichdagi organlarning shikastlanishi (masalan, AKI, o'tkir jigar etishmovchiligi) bilan birga og'ir simptomlargacha. , va qon ketish diatezi, shuningdek, Vayl sindromi sifatida ham tanilgan), o'pka qon ketishidan o'tkir gemoptiz, aseptik meningoensefalitdan o'tkir chalkashlik va o'tkir yoki subakut miokarditdan o'tkir yurak etishmovchiligi [7]. Shunga ko'ra, leptospiroz infektsiyasiga shubha qilingan uchta ko'rsatkich (i) dan iborat.o'tkir febril kasallik, (ii) sariqlik va (iii)o'tkir buyrak shikastlanishi[12]. Leptospirozning og'ir shaklini bashorat qiluvchi omillar - boshlanganda og'ir miyalji, kuchli qon ketish tendentsiyasi va aniq sariqlik. Qizig'i shundaki, oldindan mavjud bo'lganlarning mavjudligisurunkali buyrak kasalligi(kichik buyrak hajmi) yoki kattalashgan, anuriya bilan tiqilib qolgan buyraklar eng yomon natija bilan bog'liq [12]. Shunday qilib, leptospiroz bilan bog'liq buyrak kasalligi bo'lgan bemorlarni tezda davolash kerak.

6. Diagnostika

6.1. Klinik diagnostika

Leptospiroz tashxisi ta'sir qilish tarixi, xavf omillari va klinik ko'rinishlarga asoslanadi. Shubhaning yuqori ko'rsatkichi keyinchalik organlarning shikastlanishini chetlab o'tishi mumkin. Biroq, leptospiroz belgilari ko'pincha o'tkir febril sindromning boshqa sabablari, masalan, dang infektsiyasi, bezgak, gepatit va faol otoimmün kasallik bilan noto'g'ri. Leptospirozning patognomonik belgilarining yo'qligi tashxisni endemik hududdagi bemorlarda isitma va miyaljini baholashga asoslanishini anglatadi. Shuning uchun leptospirozning laboratoriya diagnostikasi juda muhimdir.

6.2. Laboratoriya diagnostikasi

Leptospirozni laboratoriyada, ayniqsa o'tkir bosqichda aniqlash qiyin. Tana suyuqliklari yoki to'qimalarida spiroxetalar yoki ularning tarkibiy qismlarini to'g'ridan-to'g'ri aniqlash, leptospirelarni kulturada ajratish yoki turli klinik bosqichlarda ma'lum antikorlarni aniqlash orqali amalga oshirilishi mumkin. Leptospirozni bezgak, dang isitmasi, rikketsiya, gripp, gepatit va sariq isitma kabi kasalliklardan klinik ko'rinishi noaniq bo'lgani uchun ajratish qiyin. Natijada, tashxisni tasdiqlash uchun laboratoriya testlari talab qilinadi. Ushbu testlar (DNK) uchun asos bo'lib, leptospirelarga, leptospirelarning o'ziga yoki ularning dezoksiribonuklein kislotasiga qarshi antikorlarni aniqlashdir. Hozirgi laboratoriya diagnostikasi to'g'ridan-to'g'ri identifikatsiyani (namunalarda Leptospira spiroketalarini yoki DNKni aniqlash yoki namunalardan organizmni ajratish) va bilvosita aniqlashni (serologik diagnostika yoki leptospiral infektsiyani aniqlash uchun serologiyani o'z ichiga oladi, bu turli xil infektsiyalarga qarshi maxsus antikorlarni aniqlashga asoslangan. Leptospiral antijenler) (1-jadval).

6.2.1. To'g'ridan-to'g'ri mikroskopik tekshirish, madaniyat va antigenni aniqlash

Leptospirelar ingichka, yorqin, faol harakatlanuvchi spirallar bo'lib, an'anaviy qorong'u maydon mikroskopi (DFM) ostida xarakterli tez aylanadigan (qo'zg'aluvchan harakatchanlik) va har bir maydonda bitta hujayrani aniqlash uchun taxminan 10 leptospire / ml kerak bo'ladi. INFEKTSION davomiyligi bir hafta ko'proq bo'lsa, DFM hosildorligi taxminan 10% o'lgan (100 dan 90% gacha). Sezuvchanlikni oshirish uchun bir nechta maxsus binoni usullari; Warthin – Serovarga xos birlamchi antikorlarni (izolyatsiya yoki kombinatsiyada) talab qiladigan yulduzli kumush rang [76] va immuno-bo'yash (immunogistokimyo, immunofloressensiya, immunomagnit antigenni ushlash va immunoperoksidazani bo'yash [77]).

Jadval 1. Leptospiroz tashxisi uchun laboratoriya tekshiruvlari.

LAMP, pastadir vositasida izotermik kuchaytirish; PCR, polimeraza zanjiri reaktsiyasi; NGS, keyingi avlod ketma-ketligi; IHA, bilvosita gemagglyutinatsiya; Elishay, ferment bilan bog'liq immunosorbent tahlili; IgM, immunoglobulin M; MAT, makroskopik aglutinatsiya testi; MCAT, mikrokapsula aglutinatsiya testi; DNK, deoksiribonuklein kislotasi; DFM, qorong'u maydon mikroskopiyasi

Bunga parallel ravishda qon, siydik, miya omurilik suyuqligi va biopsiya to'qimalaridan Leptospira madaniyati kasallik belgilari boshlanganidan keyin (leptospiroz bosqichi) dastlabki bir necha kundan 10 kungacha mumkin. Ular sekin o'sadigan (ikki baravar ko'payish vaqti 6-8 soat), tez va ifloslanishga moyil bo'lganligi sababli, kultura namunalari salbiy deb tashlashdan oldin kamida 3-4 oy davomida saqlanishi kerak), faqat 23% sezgirlik bilan, lekin zarur. dori sezuvchanlik testi uchun [6]. Shunday qilib, EMJH (Ellinghausen-McCullough-Jonson-Harris) muhiti (oleik albumin kompleksi) sigir zardobidagi albumin (V fraktsiya), Tween 80, ammoniy xlorid tiamin, monokaliy fosfat, disodiy fosfat va turli xil ozuqa moddalaridan iborat [78]. Ba'zi serovarlar uchun ko'proq maxsus T80/40/LH muhiti (polisorbat 40, laktalbumin gidrolizat, superoksid dismutaza va quyon zardobi) talab qilinadi [79]. Katta va xilma-xil tez patogen leptospirelarni birlamchi izolyatsiya qilish uchun Hornsby-Alt-Nally (HAN) yaxshi vosita bo'lib tuyuladi [80].

Leptospiral antijenlarni immunoperoksidaza, immunofloressensiya yoki immunomagnit antigenni tutib olish tizimi bakterial yuki past bo'lgan namunalar uchun ishlab chiqilgan yoki qorong'u maydon mikroskopidan foydalanib bo'lmaydi, lekin birlamchi antikorlar cheklanganligi sababli muntazam bajarilmaydi [77]. Bundan farqli o'laroq, yangi DNK kuchaytirilishi bilan nuklein kislotani aniqlash; Polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR) (ya'ni, ichki PCR, miqdoriy PCR [qPCR]), pastadir vositasida izotermik kuchaytirish (LAMP) va keyingi avlod sekvensiyasi (NGS) erta va aniq laboratoriya diagnostikasi uchun juda muhimdir, ayniqsa Biologik muhitni inokulyatsiyasi va DNK gibridizatsiyasi (DNK probi) yordamida leptospira izolyatsiyasi [81,82]. Turli xil leptospiral maqsadlar (masalan, 16S ribosomali RNK) yoki DNK diagnostika uchun kuchaytirilishi mumkin [83] va real vaqtda PCR (RT-PCR) standart PCRga qaraganda ancha sezgir va o'ziga xosdir [84]. Ba'zi RT-PCR primerlari o'ziga xos bo'lmagan joyga bog'lanib, noto'g'ri ijobiy natijalarga olib kelishi mumkinligi sababli, eng so'nggi real vaqtda multipleks PCR tahlillari ikkita primerlar to'plamidan foydalangan holda ishlab chiqilgan [85]. Ichki PCR, shuningdek, qo'shimcha primerlar to'plami bilan aniqroq va sezgir DNK saytlarini aniqlashga yordam beradi [86,87]. Biroq, leptospiroz tashxisining hozirgi tendentsiyalari resurslari cheklangan mamlakatlar uchun PCR va Elishay (oltin standart serologik MATdan osonroq) kabi serologik va molekulyar usullardan foydalanishdir [88,89]. Bundan tashqari, 16S rRNK genini (rrs) aniqlash uchun LAMP texnikasi [90] siydikdagi patogen leptospirelarni aniqlash uchun tejamkor, tez va yuqori rentabellikdir. Hozirgi vaqtda NGS tana suyuqliklarida (qon va siydik) yadro genomini tahlil qilishning eng aniq asoslangan madaniyatga bog'liq bo'lmagan usulidir [91] va leptospiroz testlarining kelajakdagi yo'nalishi leptospirozlarning molekulyar tasnifiga o'tish bo'lib, bu cheklovlarni engib o'tadi. klinik namunalardan leptospires madaniyatini izolyatsiya qilish. Shunday qilib, leptospirozning klinik diagnostikasida PCRning ahamiyati ayniqsa yaxshi va bir qancha zamonaviy usullar paydo bo'lmoqda.

6.2.2. Leptospiraga qarshi antikorlarni aniqlash

Bir nechta serologik tashxis qo'llaniladi; masalan, jinsga xos antikor testlari (bilvosita gemagglyutinatsiya [IHA], fermentga bog'liq immunosorbent tahlili [ELISA], Lepto Dri Dot [lateks aglutinatsiyasi], mikrokapsula aglutinatsiyasi [MCAT]) va serovarga xos antikor testlari (mikroskopik a) MAT]) [92,93]. Shunday qilib, diagnostika uchun MAT mezonlari (i) juftlashgan sarum titrining to'rt baravar ko'tarilishi (joriy infektsiyaning serokonversiyasi) yoki (ii) bitta yuqori titr (1:400 yoki 1:800 dan katta yoki teng, epidemiyada yuqori). hududlar) (seropozitivlik) (antikorlar infektsiyadan keyin yoki boshqa kasalliklar bilan o'zaro reaktsiyaga kirishganidan keyin bir muncha vaqt saqlanib qolishi mumkin). Bundan tashqari, MAT mintaqadagi barcha Leptospira serovarlarining jonli panelini, Butunjahon hayvonlar salomatligi tashkiloti (15 seroguruhning 19 antijeni) [95] dan keyin mahalliy standartlashtirilgan serovarlar panelini [93,94] talab qiladi. Antikorlarni infektsiyadan keyin 5-7 kun ichida aniqlash mumkin bo'lganligi sababli, MAT testi infektsiyaning birinchi kunlarida salbiy bo'lishi mumkin (titer < 1:50). Leptospiroz diagnostikasi siydik namunalari [96] orqali ham serologik, ham molekulyar aniqlash (16S rRNK), ayniqsa yaqinda infektsiyalangan (MAT 1:800 dan katta yoki teng yoki ELISA IgM-musbat yoki ikkalasi) [97] yordamida amalga oshirilishi mumkin. .

Cheklangan manbalar bilan, tegishli klinik tarix va tegishli laboratoriya testlariga asoslangan klinik bashorat qilish balli [98] yetti aspekt bo'yicha ball bilan quyidagicha: gipotenziya (3), sariqlik (2), mushak og'rig'i (2), AKI (1,5) , past gemoglobin (3), giponatremiya bilan gipokalemiya (3) va neytrofiliya (1) tavsiya etiladi (kesilgan umumiy ball 4 qabul qiluvchining operatsion xarakteristikasi egri chizig'i ostidagi maydonga ega {{10}}.78 ( 95% CI 0,68-0,89) leptospiroz tashxisi uchun [77]). Tailand-Lepto-qabul qilish ehtimoli ko'rsatkichi kasallikning og'ir klinik shubhasi bilan murojaat qilgan bemorlarda leptospirozning erta taxminiy tashxisi uchun diagnostika vositasi bo'lishi mumkin.